研究彙報第五十七期 ， Page 11-22 ，出版時間： 1997-12 ， 詳細內容

RAPD分子標誌在落花生品種鑑別之應用

作者： 張勝忠　蔡奇助

摘　　要

　　 利 用 16 條 隨 機 合 成 引 子 行 隨 機 複 製 多 型 性 DNA (Random Amplified polymorphic DNA, RAPD) ， 以 9 個 落 花 生 品 種 ( 系) 做 遺 傳 分 析 ， 共 產 生 223 個 隨 機 複 製 多 型 性 遺 傳 標 誌 (RAPD marker) ， 其 中 有 183 個 分 子 標 誌 在 品 種 ( 系) 間 具 多 型 性 (Polymorphism) ， 有 83 個 分 子 標 誌 為 特 定 品 種 ( 系) 的 特 有 標 誌 (Unique marker) 。 本 研 究 所 使 用 的 引 子 中 ， 以 B10 與 B16 最 具 分 析 潛 力 ， 不 僅 具 有 很 高 的 隨 機 複 製 多 型 性 標 誌 ， 而 且 可 偵 測 到 的 多 型 性 標 誌 與 特 有 標 誌 亦 很 高 。 另 外 ， 在 分 析 的 9 個 落 花 生 品 種 ( 系) 中 ， 有 5 個 為 台 中 場 從 立 枝 仔 地 方 品 種 中 所 選 育 之 品 系 ， 而 且 台 中 育 13 號 與 台 中 育 16 號 二 優 良 品 系 已 參 加 區 域 試 驗 。 本 研 究 不 但 可 找 到 鑑 別 上 述 二 品 系 的 遺 傳 標 誌 ， 在 台 中 育 13 號 方 面 有 8 個 特 有 標 誌 ， 台 中 育 16 號 有 21 個 特 有 標 誌 ， 此 即 顯 示 選 育 品 系 與 立 枝 仔 地 方 品 種 具 有 遺 傳 變 異 ； 且 由 樹 狀 圖 的 結 果 可 知 ， 台 中 育 16 號 在 9 個 落 花 生 品 種 ( 系) 中 ， 具 最 大 的 遺 傳 變 異 。 隨 機 複 製 多 型 性 DNA 分 析 ， 具 有 簡 便 、 易 於 操 作 及 效 率 高 等 特 性 ， 應 用 在 落 花 生 品 系 間 之 品 種 鑑 定 確 實 有 效 。

關鍵字： 落花生、隨機複製多型性 DNA 、聚合鋂連鎖反應、分子標誌、 品種鑑定。

Identification of Peanut (Arachis hypogaea L.) Varieties Using RAPD Markers

Sheng-Chang Huang and Chi-Chu Tsai

Summary

　　 Nine peanut lines/varieties were identified through random amplified polymorphic DNA (RAPD) assay. Sixteen 10-mer random primers were used in polymerase chain reaction (PCR). In total, 223 RAPD molecular markers were detected, of them, 183 markers were polymorphic and 83 markers were unique. In this study, two primers B10 and B16 revealed that they were very powerful to detect the genetic variation among nine peanut lines/varieties. Furthermore, five lines were evaluated and selected from the local variety Lichi-tzae at Taichung DAIS. Among above five peanut lines, TC13 and TC16 have been evaluated in district yield trial. Eight unique markers from TC13 and twenty-one unique markers from TC16 were determined by RAPD assay. It also indicates that these selected lines have obvious difference on molecular basis compared with the original cultivar Lichi-tzae through two generations of selection and purification. From the phylogenetic tree based on RAPD bands among nine peanut lines/varieties, TC16 was found to have an apparent genetic diversity. Therefore, it shows that RAPD technology can be applied as a rapid, easy, and sensitive technique for peanut genetic analysis.

Keywords: peanut, RAPD, PCR, molecular marker, variety identification.